創新科技
專注于等溫核酸擴增技術研發及應用
重組酶介導恒溫擴增快速檢測人鼻病毒的方法學研究_陳淑丹
摘要:目的采用反轉錄重組介導核酸擴增技術(reverse transciptase recombinase aided amplifcation,RT-RAA)建立檢測人鼻病毒的快速方法。方法根據 NCB基因庫中人鼻病毒保守序列設計引物及探針,將人鼻病毒 RNA 反轉錄為eDNA,然后使用反轉錄聲,以 eDNA 作模板,擴增檢測人鼻病毒核酸序列。研究采用構建帶有人鼻病毒核酸序列的歷粒,檢測不同濃度的質粒分析該方法的靈敏度,采用已知樣本檢測方法的特異性。結果 設計的人鼻病毒特異性引物和探針,能有效擴增出相應病毒的核酸,而與其他病毒無交叉反應。該反應條件為 39 ℃恒溫,擴增結果用時 30 min,最低擴增拷貝數為 100拷貝。結論 建立的 ㎡-RAA 檢測人鼻病毒方法靈敏度和特異性高,反應快速、操作簡單,適用于人鼻病毒的快速檢測。
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