創新科技
專注于等溫核酸擴增技術研發及應用
重組酶介導擴增方法快速檢測黃熱病毒-浙江國旅
摘要:目的 本研究采用重組酶介導的等溫核酸擴增方法(RAA),通過使用逆轉錄酵,建立黃熱病毒的一步法等溫核酸擴增(RT-RAA)方法。方法根據黃熱病毒基因組保守序列設計引物和探針,建立并分析RT-RAA 的重復性、特異性、靈敏度;以所建立方法對黃熱病毒樣本進行檢測,同時以基因測序進行驗證。結果 黃熱病毒RT-RAA 擴增,體系中加人40U的逆轉錄酵擴增效果最佳。該方法檢測時間短(<20 min),并且靈敏度高,檢測下限可達 100 copy,與登革病毒、西尼羅病毒、日本乙型腦炎病毒、基孔肯雅熱病毒等蚊媒病毒無交叉反應,具有良好的特異性。結論 構建的黃熱病毒 RT-RAA 方法具有快速、特異以及靈敏的特點,適應于黃熱病毒的口岸快速檢測。
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